Resumen
Se hizo un estudio de la distribución y propiedades de la citocroma C oxidasa- en la caña de azúcar. La enzima se extrajo con agua, de tejidos frescos de la raíz y se precipitó con sulfato de amonio. La prueba se hizo con un espectrofotómetro a 550 mu, midiéndose la disminución en densidad óptica de una solución amortiguada y reducida de citocroma C, preparada de corazón de buey, y enzima. Al separarse por fraccionación los extractos de la caña con sulfato amónico la citocroma C oxidasa se precipitó principalmente cuando alcanzó una saturación de 80 a 95 por ciento. Esto corresponde al nivel donde hay poca o ninguna precipitación en el caso de la tirosinasa, indicando que ésta puede actuar enmascarando la acción de la citocroma C oxidasa en preparaciones crudas de caña. La mejor fuente de oxidasa fue el tejido de la raíz, aunque también se observó una actividad moderada en una fracción de 80 a 95 por ciento que se separó de los extractos meristemáticos. Asimismo se observó alguna actividad en las preparaciones de la yagua y el nudo. La citocroma C oxidasa se mantuvo estable alrededor de 24 horas cuando permaneció en una solución diluida de cisteína-HCl a 2°C. Más del 50 por ciento de la actividad se suspendió después de 9 días. La enzima no se afectó adversamente al congelarse, aunque se inactivo totalmente cuando se hirvió por 5 minutos. La temperatura óptima fue de 36 a 40°C. y el pH óptimo de alrededor de 4.3. La actividad de la citocroma C oxidasa se trazó como una reacción de primer orden con referencia tanto a la concentración enzimática como al factor tiempo. El hierro pareció ser un factor limitativo en las preparaciones standard de la raíz. El Km fue 4.5 X 10-5 mols de citocroma C reducida, por litro. Tanto el mercurio como la cisteína-HCl estimularon la enzima a una concentración de 2.0 mols por ml. de digesto. El boro y el nitrato la estimularon en menor medida a la misma concentración y el cianuro causó una inhibición total. El monóxido de carbono no causó inhibición alguna, cuando se probó bajo condiciones normales de luz. La diálisis en presencia de agua destilada causó una disminución de 70 por ciento en la actividad, en 2 horas, y la inactivación casi total en 44 horas. La cisteína-HCl sirvió para reactivar la enzima. El hierro aumentó la actividad de la preparación dializada, en contraste con la no dializada, lo cual demuestra que este elemento es esencial para lograr una actividad máxima. Se discute en este trabajo el significado y el papel potencial que desempeña la citocroma C oxidasa en la caña de azúcar.